Антитела к цитоплазме нейтрофилов IgA (ANCA, АНЦА) – маркер неспецифического язвенного колита. Основные показания к применению: дифференциальная диагностика заболеваний ЖКТ (неспецифический язвенный колит, болезнь Крона), васкулиты (геморрагический васкулит/пурпура Шенлейна–Геноха).
Антитела к цитоплазме нейтрофилов – представляют собой неоднородную группу антител, образующихся на различные белки/ферменты цитоплазмы нейтрофилов и моноцитов. Было обнаружено, что в качестве антигенов АНЦА выступает ряд ферментов содержащихся в азурофильных гранулах нейтрофилов. К известным антигенным мишеням АНЦА относятся протеиназа-3, миелопероксидаза, лактоферрин, эластаза, белок BPI (bactericidal permeability increasing protein) и катепсин G. Точная причина появления таких антител не выяснена. Связываясь с нейтрофилами, АНЦА стимулируют выброс из клеток активных веществ - ферментов, активных радикалов кислорода, которые могут разрушать сосуды.
Выявление антител АНЦА IgA проводят методом ИФА.
Другим из методов их выявления является метод непрямой иммунофлюоресценции (НИФ) с использование нейтрофилов донора, фиксированных этанолом, что позволяет дифференцировать основные типы свечения аутоантител. При этом можно определить два типа свечения: 1. цитоплазматический (с-ANCA) и 2. перинуклеарный (р-ANCA), которые характерны для различных видов аутоиммунных патологий. Для точной идентификации антигена (при положительном НИФ) необходимо проводить ИФА с использованием очищенных антигенов.
Первая группа антител – с-ANCA, образуется в основном к миелобластину (протеиназе-3 лизосом), содержащемуся в азурофильных гранулах нейтрофилов и белку, усиливаещему бактерицидное действие нейтрофилов с характерным специфическим диффузным свечением при использовании метода НИФ (непрямая иммунофлюоресценция). До 90% положительных сывороток по с-ANCA содержат антитела к протеиназе-3. Цитоплазматический тип АНЦА получил название благодаря флюоресценции гранул, локализующихся в цитоплазме клетки между долями ядра лейкоцита.
Антитела с-ANCA обнаруживаются при гранулематозе Вегенера до 95% случаев. Гранулематоз Вегенера - аутоиммунное гранулематозное воспаление стенок сосудов, захватывающее мелкие и средние кровеносные сосуды. Чаще всего встречается генерализованная форма гранулематоза Вегенера с поражением верхних дыхательных путей, легких и почек. Характерным гистопатологическим признаком которого, является некротизирующий васкулит артерий и вен мелкого и среднего калибра с образованием гранулем.
Главной мишенью для второй группы антител (р-ANCA) является фермент миелопероксидаза - МПО (до 90% положительных сывороток по р-ANCA содержат антитела к миелопероксидазе), а также катепсин G, лактоферрин, лизоцин и эластаза. Появление р-ANCA характеризуется перинуклеарным свечением при их обнаружении методом НИФ. При выявлении преринуклеарного типа свечения, свечение как бы очерчивает доли ядра лейкоцита, оставляя неокрашенным ядро клетки. Этот вид антител, чаще ассоциирован с наличием у человека микроскопического полиангиита. Появление р-ANCA характерно для заболеваний ЖКТ ( аутоиммунный гепатит, неспецифический язвенный колит, первичный билиарный цирроз, первичный склерозирующий холангит.
Помимо двух основных типов свечения встречаются атипичные варианты окрашивания, которые характеризуют как Х-АНЦА, использующиеся в диагностике заболеваний кишечника. Их появление возможно при: язвенном колите (70%), болезни Крона (10%), аутоиммунном гепатите -АИГ (50%), первичном склерозирующем холангите- ПСХ (40%), первичном биллиарном циррозе (5%), и васкулитах при ревматоидном артрите (5-10%).